Vierta el medio de cultivo celular en un vaso grande y colocar el vaso en un agitador mecánico . El agitador se mezcla el medio durante la purga de la corriente de nitrógeno . El uso de este método permitirá una preparación de una gran cantidad de medio a mantener la composición más uniforme.
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Fije un tubo de rociado a la salida de un tanque de nitrógeno . Un tubo de rociado se compone de un tubo de vidrio con una punta de vidrio sinterizado incorporado en el extremo del tubo . El extremo abierto del tubo unido a una longitud de tubo de plástico conectado a un tanque de nitrógeno proporciona un flujo de nitrógeno a medida que sale al final de vidrio sinterizado del tubo por muchas corrientes de pequeñas burbujas de gas .
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Coloque el extremo de vidrio sinterizado del tubo de burbujeo en la parte inferior del vaso de precipitados y encienda el mezclador. Ajuste la velocidad de agitación del agitador mecánico para proporcionar una mezcla uniforme del medio.
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Activar el flujo de nitrógeno a la cubeta y dejar que la burbuja en el medio . El nitrógeno se saturará el medio con nitrógeno medida que se disuelve . Cada líquido posee una solubilidad finita de diferentes gases . Como el nitrógeno se disuelve en el medio , otros gases disueltos son expulsados del medio. La purga elimina los gases tales como oxígeno y dióxido de carbono del medio de cultivo .
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Permitir la corriente de nitrógeno a burbujear al menos 15 minutos para saturar el medio , dependiendo de la velocidad de flujo del gas. Una vez que la purga del medio está terminado , retire el tubo de vidrio sinterizado del vaso de precipitados y transferir el medio de cultivo celular purgado a un recipiente cerrado y almacenar en el refrigerador . La temperatura reducida del refrigerador reducirá el grado en el que los gases se disuelven en el medio durante el almacenamiento .